簡要描述:DAPI染液是一種常用于細胞核染色的藍色熒光染料,優(yōu)先結(jié)合雙鏈DNA,尤其是與小溝中的AT區(qū)域結(jié)合。此外,DAPI亦可結(jié)合RNA,但結(jié)合模式不同。與DNA復(fù)合物相比,DAPI/RNA復(fù)合物的熒光發(fā)射波長較長(約500 nm),而DAPI/DNA復(fù)合物的發(fā)射波長為約460 nm。
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品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號 | AS21L122 |
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規(guī)格 | 100mL | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
DAPI是一種常用于細胞核染色的藍色熒光染料,優(yōu)先結(jié)合雙鏈DNA,尤其是與小溝中的AT區(qū)域結(jié)合。此外,DAPI亦可結(jié)合RNA,但結(jié)合模式不同。與DNA復(fù)合物相比,DAPI/RNA復(fù)合物的熒光發(fā)射波長較長(約500 nm),而DAPI/DNA復(fù)合物的發(fā)射波長為約460 nm。
在多色熒光染色技術(shù)中,DAPI作為常用的核染色劑,因其藍色熒光能夠與綠色、黃色或紅色熒光形成鮮明對比。DAPI具有較高的細胞核特異性,幾乎不染色細胞質(zhì)。本染液濃度為3 μM,非無菌制劑。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
DAPI染液 | AS21L122 | 10mL |
DAPI染液 | AS21L123 | 50mL |
運輸與保存
藍冰運輸。-20℃避光保存,有效期 12個月。
使用方法
1. 貼壁細胞的復(fù)染
1.1 樣品準備
1.1.1 使用適當(dāng)?shù)墓潭▌┕潭ㄙN壁細胞樣品,確保細胞形態(tài)保持完整。固定后,使用DAPI染料進行細胞核核染色。
1.2 復(fù)染流程
1.2.1 用PBS短暫平衡樣品;
1.2.2 加入適量的DAPI染液,確保覆蓋細胞,孵育3-5min;
1.2.3 用PBS漂洗樣品數(shù)次,輕輕吸去多余液體,避免細胞干燥;
1.2.4 在配有合適濾片的熒光顯微鏡下觀察樣品。
2. 懸浮細胞的復(fù)染
2.1 樣品準備
2.2.1 收集懸浮細胞2×105~1×106個細胞,通過離心收集沉淀,棄去上清;
2.2.2 輕彈試管,使沉淀在剩余的液體中重懸,在加入1mL PBS;
2.2.3 將細胞懸液緩慢的加入4mL乙醇中,同時以最大的速度渦旋。將含有細胞的乙醇在-20°C放置5-15min;
2.2.4 通過離心,使細胞沉淀,棄上清;
2.2.5 輕彈試管,使沉淀松散,在加入5ml PBS。
2.2 復(fù)染流程
2.2.1 離心使細胞沉淀,棄上清,輕彈試管,使沉淀松散,加入2~3mL DAPI染液;
2.2.2 室溫下孵育15min;
2.2.3如果使用熒光顯微鏡觀察細胞,將樣品離心后,棄上清,用新鮮的緩沖液重懸沉淀。在顯微鏡載片上滴加一滴細胞懸液,加蓋片后觀察。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 使用觀察藍色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
4. 自備PBS,固定液及抗熒光淬滅封片液。
5. 第一次使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。
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