EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點。...
一、細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性細(xì)胞增殖是活細(xì)胞的重要?理功能之?,細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性檢測所用的方法相近,但實驗?zāi)康牟煌?。?xì)胞增殖是通過細(xì)胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)判斷細(xì)胞的數(shù)量變化,例如細(xì)胞計數(shù)法,反應(yīng)的就是細(xì)胞真實的數(shù)量。而細(xì)胞活性檢測,則是通過檢測細(xì)胞受到藥物或其他措施處理后,標(biāo)志物產(chǎn)量或濃度的變化,進(jìn)而判斷藥物或處理措施的作用,細(xì)胞活性檢測所得結(jié)論,往往反映了實驗設(shè)計的目的。細(xì)胞增殖檢測,因檢測標(biāo)志物的不同,目前大致分為四類:DNA合成檢測、代謝活性檢測、細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測和ATP濃度...
生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響,主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動、保存時間和容器等。這些因素可單獨起作用,但更多情況是協(xié)同作用??偟膩碚f,蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護(hù)、避免輔助因子喪失等,以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大,故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質(zhì)對熱敏感,溫度越高,穩(wěn)定性越差。因此,低溫保存蛋...
牛血清白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術(shù)得到5種組份,其中第五種就是白蛋白),CAS號為9048-46-8,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,無免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用...
重組腸激酶(Enterokinase,lightchain)是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让?,也可以將帶有這個識別序列的融合蛋白切開。由于腸激酶具有高度專一性,水解效率高的特點,它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā),其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。腸激酶具有高度專一性,水解效率高的特點,它被廣泛地應(yīng)...
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生物學(xué)研究及藥物研發(fā)細(xì)胞實驗中需要經(jīng)常面對的常規(guī)操作。隨著細(xì)胞越來越嬌,人工越來越貴,各種細(xì)胞凍存液應(yīng)運而生,如何從名目繁多的細(xì)胞凍存液中選擇變成一個問題。本文從細(xì)胞凍存液分類,應(yīng)用場景,使用效果等多方面加以闡釋,希望能對如何選擇細(xì)胞凍存液有所助益。一、細(xì)胞凍存液的分類從成分劃分(1)滲透性和非滲透性滲透性保護(hù)劑分子量小可滲透到細(xì)胞內(nèi),如甘油、DMSO、乙二醇等,其在細(xì)胞冷凍存*凝固之前,滲入細(xì)胞內(nèi),降低細(xì)胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度,阻止細(xì)胞內(nèi)水分外滲,避免細(xì)胞過...
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中,及時凍...
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